特性：

NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤细胞)安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

特性：

安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

注意事项：

1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KITMouse HD3(Histone Deacetylase 3) ELISA KitN,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺冻切片特恩布尔（TURNBULL）铁（二价）染色试剂盒

MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) ELISA KITMouse PDIA4(Protein disulfide-isomerase A4) ELISA KitN,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺细胞特恩布尔（TURNBULL）铁（二价）染色试剂盒

LGALSL (Galectin-related protein) ELISA KITMouse β-actin(Beta actin) ELISA KitN-乙酰-D-半乳糖胺石蜡切片皮尔斯（PERLS-DAB）非血红素铁（三价）强化染色试剂盒

GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) ELISA KITMouse CEBPD(CCAAT/enhancer Binding Protein(C/EBP), delta) ELISA KitN-乙酰-D-半乳糖胺冻切片皮尔斯（PERLS-DAB）非血红素铁（三价）强化染色试剂盒

GLMN (Glomulin) ELISA KITMouse CSF1R(Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor) ELISA KitN,N-二乙基对苯二胺细胞皮尔斯（PERLS-DAB）非血红素铁（三价）强化染色试剂盒

GPR65 (Psychosine receptor) ELISA KITMouse ICTP(Cross-linked C-terminal Telopeptide of Type I Collagen) ELISA KitN,N-二乙基对苯二胺石蜡切片特恩布尔（TURNBULL-DAB）非血红素铁（二价）强化染色试剂盒

ARHGAP35 (Rho GTPase-activating protein 35) ELISA KITMouse ADAM10(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10) ELISA Kit萘酚AS-D冻切片特恩布尔（TURNBULL-DAB）非血红素铁（二价）强化染色试剂盒

GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KITMouse CD26(Dipeptidyl peptidase 4) ELISA Kit萘酚AS-D细胞特恩布尔（TURNBULL-DAB）非血红素铁（二价）强化染色试剂盒

PPPDE1 ELISA KitTestis  肿瘤抑制基因Testin抗体氟化锡(II)Korser氏肉汤

PPP6C ELISA KitZNF288/ZBTB20  锌指蛋白288抗体四乙基乙二醇单甲酯MR-VP

PPP4C ELISA KitALOX15/15 Lipoxygenase 1  花生四烯酸15脂氧合酶1抗体四乙基乙二醇单甲酯蛋白胨水（色氨酸肉汤）

PPP5C ELISA KitABI3BP  ABI基因家族成员3结合蛋白抗体反式-2-己烯醛卫矛醇半固体

PPP1R3F ELISA KitMTCBP1/ADI1  膜型基质金属蛋白酶胞质尾结合蛋白1抗体反式-2-己烯醛山梨醇发酵管

PPT1 ELISA KitBCMP11/AGR3  乳腺癌膜蛋白11抗体（前梯度同源蛋白2）特美汀（新型革兰氏阴性菌抗生素）丙二酸盐

PPP1R7 ELISA KitALDH1A1  胞质乙醛脱氢酶1抗体氧化铽(III,IV)水杨苷发酵管

PPP3CB ELISA KitABH8/ALKBH8  AlkB同源蛋白8抗体氧化铽(III,IV)赖氨酸脱羧酶肉汤

实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。