人体脂肪酶主要来源于胰腺。血清LPS得到增高常见于急性胰腺发炎及胰腺癌,偶见于慢性胰腺发炎。急性胰腺发炎时血清淀粉酶增高时间较短,而血清LPS的升高可持续10-15天。腮腺炎时,LPS通常在正常范围,因而LPS对急性胰腺发炎的研究更具有特异性。脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸,通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脂肪酶是分解脂肪的酶,测定血清脂肪酶主要用于对急性胰腺发炎的研究。
测定原理:
甘油三脂和水制成的乳胶,因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。胶束中的甘油三脂在脂肪酶(Lipase;LPS)的作用下发生水解,使胶束分裂,散射光或浊度因而减低,减低的速率与脂肪酶活力有关。
产品优点如下:
1、快速简便:速率法,20分钟可完成20-40例样本的测定。
2、取样量微:取样量仅为50l左右
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =102%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测各种动物血清(浆)、组织等
试剂组成及配制(50 管/48 样):
试剂一:底物缓冲液,60ml×2 瓶,4°C冷藏保存 6 个月,临用前 37°C预温后使用;
试剂二:Tris 缓冲液,10ml×1 瓶,4°C冷藏保存 6 个月;
试剂三:生理盐水,10ml×1 瓶,短期用 4°C保存,长期用需放-20°C保存;
试剂四:10ml×1 瓶,4°C密封保存 6 个月。
所有试剂在测试前均需放置至室温。
所需仪器及自备试剂:
1、可见分光光度计(比色测定波长为420nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按说明书操作取50l样本加入底物缓冲液
2、420nm波长,1cm光径测OD1
3、37℃水浴10分钟后420nm波长,1cm光径测OD2