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兔子IFN-gama elisa检测试剂盒的基本原理
2020.01.03   点击567次

兔子IFN-gama elisa检测试剂盒的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,zui后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。因此,ELISA检测是一项定位、定性和定量(敏感度可达每毫升ng~pg水平)的综合技术。常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AKP)

操作注意事项:

● 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

● 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

● 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

● 加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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