探针法结膜支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Conjunctivae

货号：Mqt-con-20      规格：20个反应

货号：Mqt-con-50      规格：50个反应

货号：Mqt-con-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    可以特异性检测结膜支原体，与其他生物无交叉反应。

2，    灵敏度高，检测极限为反应液中4个基因组。

3，    使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，    带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

结膜支原体（Mycoplasma Conjunctivae）是绵羊、山羊、羚羊等反刍动物的传染性角膜结膜炎（IKC）的主要病原体，属于柔膜菌纲（Mollicutes），营寄生生活，代谢网络高度简化，符合其专性寄生的生活方式。由于缺乏完整的三羧酸循环（TCA）和电子传递链，其能量代谢主要依赖糖酵解途径，将葡萄糖转化为乳酸或乙酸，并伴随有限的ATP生成。这种低效的产能方式与其在宿主体内的低复制率相符，也解释了其在体外培养时的缓慢生长特性。此外，该菌无法合成多种必需氨基酸（如精氨酸、色氨酸）和不饱和脂肪酸，必须从宿主细胞摄取这些物质以满足生长需求。在实验室培养时，需在培养基中添加动物血清（提供胆固醇和脂肪酸）以及葡萄糖等碳源，以模拟其自然生存环境。结膜支原体的代谢副产物，如活性氧（ROS）和有机酸，可能对宿主眼表组织造成间接损伤，加剧炎症反应。然而，与某些致病性更强的支原体相比，结膜支原体的代谢毒力因子相对较少，其致病性可能更多依赖于免疫介导的炎症反应，而非直接的细胞毒性作用。这种代谢上的局限性也使其在宿主体内的生存策略更倾向于慢性或亚临床感染，而非急性致病。

结膜支原体的检测通常结合微生物培养、分子生物学和血清学方法。传统培养需使用特殊培养基（如SP-4或改良Hayflick培养基），但由于生长缓慢（2-7天）且易受污染，现已较少单独使用。PCR技术因其高灵敏度和特异性成为**方法，常用靶标包括16S rRNA基因、粘附素基因或特异性膜蛋白基因等。实时荧光定量PCR（qPCR）可进一步提高检测效率，并实现病原体载量分析。对于大规模筛查，ELISA可用于检测血清中的特异性抗体，但存在交叉反应可能。近年来，高通量测序（如宏基因组测序）也被用于野生动物或复杂样本中的病原体鉴定，但成本较高。在临床实践中，通常采用PCR结合眼部分泌物涂片镜检（吉姆萨染色）以提高诊断准确性。

探针法结膜支原体实时定量PCR试剂盒针对一个膜蛋白基因进行PCR鉴定，引物经BLAST验证为特异性靶向结膜支原体，与其他生物的基因组无交叉反应。通过检测亲缘关系较近的支原体和寄生于羊的其他微生物，证实本试剂盒对结膜支原体具有特异性，适用于结膜支原体的检测和鉴定。

本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。