基本信息

产品描述

SB431542是一种有效的，选择性ALK5抑制剂，无细胞试验中IC50为94 nM，对ALK5的作用比对p38、MAPK和其他激酶强100倍。

靶点（IC50 & Targe）

ALK5,94 nM

ALK4,140 nM

体外研究

SB-431542作用于A498细胞无细胞毒性，LD50大于30 μM。[1] SB-431542也抑制ALK4和ALK7，这两种含有磷酸化Smad2。SB-431542对ALK1, ALK2, ALK3,和ALK6抑制作用不大, 这四种含磷酸化Smad1。SB-431542选择性抑制内生的活化素，而对BMP信号没有作用效果。SB-431542可以诱导Smad2/Smad4和Smad3/Smad4依赖的转录。[2] 在A498细胞中, SB-431542抑制TGF-β1诱导的胶原Iα1 和PAI-1 mRNA，IC50分别为60和50 nM。此外，SB-431542抑制TGF-β1诱导的纤连蛋白mRNA和蛋白，IC50分别为62和22 nM。 [3]SB-431542抑制TGF-β调节的生长因子,包括PDGF-A, FGF-2 和HB-EGF, 可以增强MG63细胞增殖。SB-431542也抑制TGF-β诱导的 c-Myc和p21WAF1/CIP1。[4] 在FET, RIE, 和Mv1Lu细胞中，SB-431542 明显抑制TGF-β诱导的G1 期阻滞，且SB-431542诱导细胞周期S期细胞数累积。在NMuMG和PANC-1细胞中，SB-431542也抑制TGF-β调节的上皮细胞向间质转型(EMT)。[5] SB-431542通过人类DC的功能成熟和IL-12产生而诱导NK活性。[6]

体内研究

在结肠癌模型中，SB-431542导致 毒性T淋巴细胞激活 (CTL) ，且通过TGF-ß 抑制的DC功能改变，产生抗癌免疫效果。[6]

激酶实验

激酶实验:

SB-431542溶解在DMSO中，浓度为10 mM。在杆状病毒表达系统中，TGFβRI的激酶域,：第200号氨基酸到C-端,和全长Smad3蛋白表达作为 N-端谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白。加入谷胱甘肽凝胶来纯化蛋白。用0.1 M 无菌过滤的碳酸氢钠（pH 为7.6）包被FlashPlates,每100 μL中加入700 ng GST-Smad3。实验buffer包含50 mM HEPES (pH 为7.4), 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 1 mM DTT, 100 mM GTP, 3 μM ATP，0.5 μCi/孔33P-ATP, 及85 ng GST-ALK5。 在30oC下温育3小时。在Packard TopCount 96孔闪烁计数器上读数。

细胞实验

Cell lines: A498细胞

Concentrations: 100 μM 左右

Incubation Time: 48小时

Method: A498细胞按每孔5-10×103个接种在96孔板上。细胞血清饥饿处理24小时，然后用SB431542处理48小时，测定细胞毒性。然后加入XTT标签和细胞温育4小时，测定细胞活力。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 腹腔注射结肠-26肿瘤细胞的BALB/c鼠

Formulation: 溶于0.1 % DMSO

Dosages: 1 μM 溶液, 100 μL/鼠

Administration: 腹腔注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Callahan JF, et al. J Med Chem, 2002, 45(5), 999-1001.

[2] Inman GJ, et al. Mol Pharmacol, 2002, 62(1), 65-74.

[3] Laping NJ, et al. Mol Pharmacol, 2002, 62(1), 58-64.

[4] Matsuyama S, et al. Cancer Res, 2003, 63(22), 7791-7798.

[5] Halder SK, et al. Neoplasia, 2005, 7(5), 509-521.

[6] Tanaka H, et al. Oncol Rep, 2010, 24(6), 1637-1643.